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介紹小鼠成纖維細(xì)胞的傳代流程

小鼠成纖維細(xì)胞分離自小鼠皮膚組織的貼壁細(xì)胞，成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞(mesenchymalcell)分化而來。功能活躍的細(xì)胞稱為成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。纖維細(xì)胞（fibrocyte），結(jié)締組織中數(shù)目最多的細(xì)胞，相對(duì)靜止的細(xì)胞稱纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞數(shù)目最多，胞體大，為多突的紡錘形或星形的扁平細(xì)胞，細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，細(xì)胞輪廓不清，具有突起。其形態(tài)尚可...

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小鼠單核巨噬細(xì)胞的注意事項(xiàng)！

1968年從雌性BALB/c小鼠的腫瘤中建立，J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞在抗體依賴性吞噬作用中具有活性[Pubmed:1101071]。它們的生長(zhǎng)受到硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制[Pubmed:318922]。它們合成大量溶菌酶并表現(xiàn)出輕微的細(xì)胞溶解作用，但主要是抗體依賴性吞噬作用。白細(xì)胞介素1β(Il1b)由這條線連續(xù)合成。小鼠單核巨噬細(xì)胞注意事項(xiàng)：1)該細(xì)胞大多數(shù)是貼壁狀態(tài)，少量的懸浮細(xì)胞。細(xì)胞傳代時(shí)使用細(xì)胞刮鏟收集細(xì)胞。2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)70%-90%...

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關(guān)于人胚腎細(xì)胞293T的培養(yǎng)步驟說明

人胚腎細(xì)胞293T是293細(xì)胞株插入SV40T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生細(xì)胞株。人胚腎細(xì)胞293T的培養(yǎng)步驟：1）培養(yǎng)皿/瓶用槍頭或移液管吸去原培養(yǎng)液；2）無菌PBS或無菌生理鹽水洗滌3次（按培養(yǎng)體積加入）；3）加入適量胰酶消化適當(dāng)時(shí)間（一般胰酶為0.25%；9cm/10cm培養(yǎng)皿和25cm培養(yǎng)瓶，一次加入1mL胰酶。消化時(shí)間視細(xì)胞類型等多種情況綜合考慮，一般如果是細(xì)胞株，非原代培養(yǎng)，消化1－2分鐘足矣）；4）用槍頭吹打數(shù)十次（視細(xì)胞類型而定。一般細(xì)胞株30...

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大鼠軟骨細(xì)胞的制備要注意的事項(xiàng)

軟骨細(xì)胞是軟骨組織中的主要細(xì)胞成分。位于軟骨陷窩中。軟骨細(xì)胞的核小，呈圓形或橢圓形，有1至數(shù)個(gè)核仁，胞質(zhì)略嗜堿性。細(xì)胞形狀依軟骨組織而異：在透明軟骨，靠近軟骨膜的細(xì)胞呈橢圓形，其長(zhǎng)軸與軟骨表面平行，深部的細(xì)胞逐漸變?yōu)閳A形或卵圓形，常常兩個(gè)或多個(gè)聚集成群，稱為同源細(xì)胞群；在彈性軟骨，細(xì)胞的形態(tài)基本上與透明軟骨的相似；在纖維軟骨，細(xì)胞略呈卵圓形，夾在膠原纖維束之間，單個(gè)存在、成對(duì)存在或排列成單行。大鼠軟骨細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激...

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小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1的培養(yǎng)操作步驟

小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1能夠特異性表達(dá)成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Runx-2和堿性磷酸酶等早期成骨分化表型標(biāo)志物,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于成骨分化的研究中。成骨細(xì)胞的來源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外組織。及人的胚胎顱骨或新生動(dòng)物的顱骨為成骨細(xì)胞的常用來源。小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1的培養(yǎng)操作步驟：1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-3...

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小鼠成纖維細(xì)胞組織塊的培養(yǎng)方法說明

成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織中最常見而且數(shù)量較多的一種細(xì)胞，位于膠原纖維近旁并依附于其上。此細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)可隨其功能狀態(tài)的不同而改變。在功能活動(dòng)旺盛時(shí)，成纖維細(xì)胞的胞體較大，呈扁平星形，有突起。胞核呈卵圓形，核染色質(zhì)較少，著色淺，核仁明顯。胞質(zhì)較多，弱鹼性，內(nèi)含豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核蛋白體、高爾基復(fù)合體以及微絲和微管等結(jié)構(gòu)，表明此種細(xì)胞具有合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和多糖蛋白，形成膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維和基質(zhì)的作用。在相對(duì)靜止或功能活動(dòng)不活躍時(shí)的細(xì)胞，稱為纖維細(xì)胞。這種細(xì)胞...

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人膜間皮細(xì)胞使用前要做好哪些工作

間皮細(xì)胞就是構(gòu)成間皮的細(xì)胞，間皮是由一層細(xì)胞組成的，胸膜，腹膜和器官相接的面上都有間皮細(xì)胞。間皮的作用是起到潤(rùn)滑作用，使身體內(nèi)的器官與器官、器官與胸膜或與腹膜之間能得到良好的保護(hù)，不會(huì)因?yàn)榛ハ嗄p受傷。間皮的潤(rùn)滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)做到的，所以間皮細(xì)胞就是身體內(nèi)的正常細(xì)胞。人膜間皮細(xì)胞使用前要做好哪些工作：1）凍存人膜間皮細(xì)胞的復(fù)蘇：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在10...

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小鼠骨樣細(xì)胞是維持成熟骨新陳代謝的主要細(xì)胞

小鼠骨樣細(xì)胞是成熟骨組織中的主要細(xì)胞，相當(dāng)于人的成年期，由骨母細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來。當(dāng)新骨基質(zhì)鈣化后，細(xì)胞被包埋在其中。此時(shí)細(xì)胞的合成活動(dòng)停止，胞漿減少，成為骨細(xì)胞。骨細(xì)胞能產(chǎn)生新的基質(zhì)，改變晶體液，使骨組織鈣、磷沉積和釋放處于穩(wěn)定狀態(tài)，以維持血鈣平衡。骨細(xì)胞對(duì)骨吸收和骨形成都起作用，是維持成熟骨新陳代謝的主要細(xì)胞。骨組織的細(xì)胞(小鼠骨樣細(xì)胞)成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi)，其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。小鼠骨樣細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的...

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