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人乳腺癌細胞 MCF-7

簡要描述:細胞特性:
1) 來源:腺癌,乳腺,胸水
2) 形態(tài):上皮細胞樣 貼壁生長
3) 含量:>1x106 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。

  • 產(chǎn)品型號:MCF7
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-08-21
  • 訪  問  量: 1349

詳細介紹

品牌安為應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)




                      MCF-7 人乳腺癌細胞     

 

MCF-7MCF7

細胞鑒定

STR鑒定已通過

細胞來源

國家資源庫

細胞背景

該細胞是1970從一名69歲的白人女性轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者的胸腔積液中分離建立的。該細胞保留了多個分化乳腺上皮的特性,包括:能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成隆突結(jié)構(gòu)(domes);該細胞表達WNT7B癌基因;TNF-α可以抑制MCF-7細胞的生長;抗雌激素處理能調(diào)節(jié)細胞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP)的分泌。

培養(yǎng)條件

1) 準備MEM(推薦awcell-0012)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;添加0.01mg/ml 胰島素;雙抗1%。2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

注意事項:

 

注意事項:

a. mcf-7 細胞一般情況下是生長緩慢的細胞系,前期呈島狀生長,隨著細胞生長,細胞會逐步變成扁平單層細胞。通常需要6-12天才能達到80%生長密度,如果生長速度比正常情況還要緩慢,可能需要換另外批次的血清,把血清濃度提高到20%也有助于改善細胞生長情況。

b. mcf-7細胞在復蘇和傳代后,會在培養(yǎng)基中觀察到成團的細胞漂浮物,對于這個細胞來說這是正常的情況,在復蘇和傳代后前三天可以靜置細胞不做處理,三天后貼壁情況會有所改善,但懸浮的細胞團仍會出現(xiàn),這些懸浮的細胞是活細胞在換液和傳代時需要離心回收,這些懸浮細胞團可以通過使用移液器(5mL或者更?。﹣泶瞪ⅲ匦麓蛉氲劫N壁細胞培養(yǎng)瓶中。丟棄這些懸浮細胞會使細胞密度變低,細胞生長緩慢。

c. 使用0.25% (w/v) Trypsin - 0.53 mM EDTA 消化細胞。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

4)運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。

運輸形式

低溫:11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系

常溫2 T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,到后按照細胞接收后的處理方法操作。

生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

 


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