l 細胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。形態(tài)為上皮形，模式染色體數(shù)為55，在免疫抑制小鼠中不致瘤。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白；表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體；該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。

l 細胞特性

1.來源：肝細胞癌

2.形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

3.含量：>1x106  細胞數(shù)

4.規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5.用途：僅供科研使用。

l 培養(yǎng)條件：

1）準(zhǔn)備MEM（推薦AWCell-0012）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

1. hepg2細胞復(fù)蘇或傳代后會有少部分的細胞貼壁和部分懸浮的細胞，復(fù)蘇兩天后細胞會從貼壁細胞向外開始生長，有時細胞在生長過程中，細胞會在貼壁細胞的上方生長，形成不同的細胞層，這種情況會有發(fā)生。 在細胞復(fù)蘇的一周內(nèi)，培養(yǎng)瓶中 通常會有懸浮的活的細胞團，在換液過程中不要丟棄在這些活的懸浮細胞，可以通過離心（125×g）回收細胞，重新打回到培養(yǎng)瓶中，分離或者丟棄漂浮的活細胞會使細胞數(shù)量變少，引起細胞的停滯生長或細胞死亡。

2.培養(yǎng)條件的細微變化，尤其是pH和培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量，可能會影響細胞的生長狀況，在細胞的生長過程中會有細胞內(nèi)的液泡出現(xiàn)，特別在細胞快要融合是會出現(xiàn)這種情況。培養(yǎng)細胞時使用未被滅活的高質(zhì)量、低內(nèi)毒素的胎牛血清，可以使細胞更好的貼壁和形成單層細胞。

3. 細胞在生長過程中可以通過將血清濃度提到到20%來改善細胞生長緩慢的情況。（參考atcc 有關(guān)該細胞的描述）

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全:

 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。