l 細胞鑒定                 

種屬鑒定已通過                    

l 細胞背景                 

此細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性?？梢园嬛行约t并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖?？梢钥贵w依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導分解紅血球但對腫瘤靶細胞無作用。                                        

l 細胞特性                    

1） 來源：鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；單核細胞；巨噬細胞。      

2） 形態(tài)：不規(guī)則圓形，紡錘狀，貼壁細胞，少量懸浮。                    

3） 含量：>1x106  細胞數(shù)。                    

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝。                    

5） 用途：僅供科研使用。                    

l 培養(yǎng)條件                    

1） 準備DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺，0.11g / L丙酮酸鈉) (推薦awcell-0001)培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %；P/S青霉素-鏈霉素 1%。                    

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。                    

l 注意事項                    

注意事項：                    

（a）在細胞生長的初始階段，細胞以貼壁的形式生長并呈現(xiàn)出長方體的形態(tài)和有“偽足”延伸。隨著培養(yǎng)時間的增加，細胞呈現(xiàn)圓形并以疊加的形式生長。細胞密度達到一定的程度，會有細胞以懸浮的方式散落到到培養(yǎng)基中，鏡下觀察會發(fā)現(xiàn)懸浮和貼壁的細胞會同時出現(xiàn)。                    

（b）該細胞傳代時不需要用胰酶消化。傳代時，用無菌細胞刮刮拭培養(yǎng)表面將細胞刮落，收集離心后重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中。                    

（c）該細胞形態(tài)上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形。當細胞密度較大時，細胞會輕微脫落變圓或者許多細胞堆積在一起，有些細胞甚至脫落漂浮。這些漂浮的細胞是存活的，在傳代時應收集起來，離心后細胞沉淀可以繼續(xù)培養(yǎng)。

（d）血清質(zhì)量差異可能引起細胞貼壁能力變化，應選用高質(zhì)量的胎牛血清。                    

該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：                    

該細胞用細胞刮鏟替代胰酶來對細胞進行處理。用無菌細胞刮鏟刮拭細胞附著培養(yǎng)表面將細胞刮落，收集細胞后離心去上清，重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)。收貨后第一次傳代1:2進行，后續(xù)可以根據(jù)實際的情況以1:2~1:4的比例進行傳代。                    

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。                    

l 運輸形式                    

低溫:（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。                    

常溫: （2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。                    

l 生物安全                    

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。                    

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。